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目标
显示肠道杯状细胞分泌的酸性粘多糖（酸性粘蛋白），即粘液的主要成分。
意义
粘液层的完整性和组成。健康的粘液层厚实且连续；受损的粘液层会变薄、不连续甚至缺失。
肠道通透性升高（功能受损）的组别，其肠道粘液层（形态结构）也会出现相应的变薄或破坏。阿尔新蓝染色可以直观地证实这种形态学的变化。
试剂
产品货号: G1560
产品名称: 阿利新蓝染色试剂盒(pH=2.5)
产品规格: G1560-350ml
产品价格: 370.00元 / 当前活动：染色试剂同系列5送2
产品规格: G1560-3100ml
产品价格: 620.00元 / 当前活动：染色试剂同系列5送2
实验步骤
- 脱蜡至水：
- 将石蜡切片依次放入二甲苯I、二甲苯II中各10分钟。
- 依次放入100%、95%、85%、70%的梯度酒精中各5分钟。
- 用蒸馏水或去离子水充分冲洗。
- 阿尔新蓝染色：将切片浸入阿尔新蓝染色液中。室温下染色30分钟（具体时间请参照说明书，通常在20-40分钟之间）。为防止染料挥发沉淀，建议在湿盒或密闭容器中进行。
- 冲洗：取出切片，用酸性分化液（或0.5%-1%冰醋酸水溶液）快速冲洗，以去除非特异性背景着色。再用流动的自来水轻轻冲洗切片数分钟，直至水变清澈。
- 复染：
- 浸入核固红染色液中复染细胞核 2-5分钟。
- 或用苏木素复染（但苏木素后需要盐酸酒精分化，步骤稍多）。
- 冲洗：用自来水冲洗掉多余的核固红染液。
- 脱水、透明与封片：迅速依次通过70%、85%、95%、100%的梯度酒精脱水（每缸数秒即可）。放入二甲苯中透明（2次，每次2分钟）。从二甲苯中取出后，趁热用中性树胶封片。
结果判读
- 酸性粘多糖/粘蛋白：亮蓝色或湖蓝色。
- 细胞核：红色（如使用核固红复染）。
- 背景：应为无色或极浅的蓝色。
- 对照组：阿尔新蓝染色：应可见完整、连续、较厚的蓝色粘液层覆盖在绒毛表面，杯状细胞丰富，染色深蓝。通透性：血清荧光值低。
- 实验组：阿尔新蓝染色：粘液层可能变薄、不连续甚至局部缺失。杯状细胞数量可能减少，染色变浅。通透性：血清荧光值显著高于对照组。
重要注意事项
- 样本一致性：所有组别的肠道组织应取自相同的解剖位置（如都是结肠或都是回肠），不同区段的肠道结构本身就有差异。
- 染色条件：确保所有切片在同一批次、相同条件下进行染色，以减少技术误差。
- 盲法分析：最好由不知道分组情况的研究人员进行图像分析和数据测量，以避免主观偏差。
- pH值选择：索莱宝的常规试剂盒通常是pH 2.5的。如果您想深入研究粘蛋白的类型（例如区分硫酸化粘蛋白和唾液酸粘蛋白），可能需要调节pH值（pH=1.0或pH=2.5）